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水平電泳槽的使用步驟及使用注意事項

更新時(shí)間:2022-08-29      點(diǎn)擊次數:1543
   水平電泳槽是用來(lái)對少量核酸樣品進(jìn)行快速瓊脂糖電泳的裝置,制膠可在多用制膠器的膠槽中完成(無(wú)需膠布封口)。配備的多用途制膠器可以灌制60×60㎜的小膠、120×60mm的寬膠,還可以灌制60×120㎜的長(cháng)膠,以及120×120㎜的大方膠。本電泳槽還配有8種不同齒數和厚度的梳子供選擇,樣品能量:2、3、6、8、11、13、18、25齒,標準梳和各種制備梳。灌制好的各種大小的瓊脂糖凝膠均可以放入水平電泳槽的平臺上進(jìn)行電泳,做到槽多用,可節省實(shí)驗空間和實(shí)驗經(jīng)費。
 
  水平電泳槽的使用步驟及使用注意事項:
  一、電泳槽制膠步驟
  1、將瓊脂糖放在濾水浴或電磁攪拌器、微波爐中加熱至*溶化,然后冷卻至55℃左右,加入適當濃度的EB染料。
  2、將凝膠托盤(pán)放入配套的制膠盒中,或選用膠布封住托盤(pán)兩端,倒入冷卻后的瓊脂糖溶液。
  3、制膠前可根據所需凝膠的大小插入隔板,制膠前先用少許膠把隔板與托盤(pán)底部的縫隙封住,待凝固后再倒入凝膠。
  4、根據需要插入加樣梳,在室溫下待瓊脂糖自然凝固。
 
  二、電泳槽電泳步驟
  1、瓊脂糖凝固后,輕輕拔出加樣梳,并將托盤(pán)從制膠盒,制膠器中取出或撕下膠布,移入電泳槽。
  2、凝膠梳井端應在負極,在電泳槽中注入緩沖液,使緩沖液液面沒(méi)過(guò)凝膠即可。
  3、用微量取樣器在梳井中加樣,依據極性蓋緊上蓋,連接電泳儀,選擇合適的電泳條件,開(kāi)始電泳。
 
  水平電泳槽的使用主要事項:
  1.不允許將EB染色液加入電泳槽中,必須在電泳結束后且在染色區內進(jìn)行染色。
  2.正負級分不清楚,造成樣品跑入緩沖液。黑色為負極,紅色為正極,樣品由負極往正極跑,需在靠近負極一端加樣。
  3.加樣的時(shí)候,不能將槍頭插得太深,避免膠塊被穿透。
  4.必須按照要求的濃度對膠的濃度進(jìn)行制備,不然,小分子物質(zhì)會(huì )從膠塊中跑出。
  5.若沒(méi)有經(jīng)驗,Z好定時(shí),不然樣品可能因為疏忽從膠塊中跑出
  6.樣品必須在上樣緩沖液中*溶解,不然在凝膠中不能移動(dòng)。采用同種緩沖液制膠和電泳,點(diǎn)樣必須在緩沖液加到凝膠之上以后。
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